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基因敲除常见方法
发布日期:2015-01-19 16:19

 来源:生物探索

一、常规基因敲除鼠(Conventional Knockout)

常规基因敲除是通过基因打靶,把需要敲除的基因的几个重要的外显子或者功能区域用Neo Cassette 替换掉。这样的小鼠其全身所有的组织和细胞中都不表达该基因产物。此类基因敲除鼠一般用于研究某个基因在对小鼠全身生理病理的影响,而且这个基因没有胚胎致死性。

二、条件性基因敲除小鼠(Conditional Knockout)

条件性基因敲除小鼠是通过基因打靶,把两个loxP位点放到目的基因一个或几个重要的外显子的两边。该小鼠和表达Cre酶小鼠杂交之前,其目的基因表达完全正常。当和组织特异性表达Cre酶的小鼠进行杂交后,可以在特定的组织或细胞中敲除该基因,而该基因在其他组织或细胞表达正常。

条件性基因敲除鼠适用范围为:(1)该基因有胚胎致死性;(2)用于研究该基因在特定的组织或细胞中的生理病理功能。

三、基因敲入小鼠(Knockin)

基因敲入小鼠是通过基因打靶,把目的基因序列敲入到小鼠的相应基因位点,使用小鼠的表达调控元件指导目的基因表达。

此类基因敲入鼠一般用于药物的筛选,信号通路的研究等。

获得嵌合体及之后品系纯化详细流程:

 

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